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影片設定在1998年，影片不再是只把焦點集中在愛麗絲這個角色身上，吉爾將在由安布雷拉（Umbrella）制造的僵尸潮的爆發中扮演重要角色。里昂·肯尼迪（LeonKennedy）也將入主，在《生化危機4》電影中就有大量來自游戲第五代的boss，所以這次再把游戲第四代的第一男主角里昂帶入電影版《生化5》也算情理之中。