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內容描述孤兒彼得帕克〈安德魯加菲爾德飾〉從小寄居在梅姨(莎莉費爾德飾)與班叔(馬丁辛飾)家中，內向害羞的他在校雖常被欺負，但隨著帕克愛上學校的風云人物關史黛西〈艾瑪史東飾〉後，兩小無猜的純純初戀讓他孤獨的生命找到希望。當帕克在班叔家中發現父親留下的一個神秘包包後，他開始尋找當年雙親離奇失蹤的線索，并因此找上父親當年實驗室的夥伴康納博士(瑞斯伊凡飾)。在一次意外遭蜘蛛咬傷後，帕克突然擁有異於常人的飛天攀爬能力，成為媒體與社會討論撻伐的神秘人物：蜘蛛人。蜘蛛人的秘密讓帕克必須在女友及她擔任警察局長的父親面前隱藏身分，而當他發現康納博士的真實身分其實是大反派蜥蜴博士後，帕克該如何面對外界對蜘蛛人身份與能力的質疑，不顧一切挺身而出，拯救紐約市民免於災難？